詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 黃柏探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Cortex phellodendri |
貨號(hào) | FS-P99152 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
DEV dextrose broth DEV葡萄糖肉湯人前列腺上皮細(xì)胞裂解物N-乙烯基咔唑NAIF1 protein( CB12-327) 核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1(多肽)
DEV ENDO agar DEV ENDO瓊脂人前列腺成纖維細(xì)胞裂解物N-乙烯基咔唑cath-B/CB(Cathepsin B) 組織蛋白酶B抗原
DEV gelatin agar DEV明膠瓊脂人前列腺平滑肌細(xì)胞裂解物N-乙烯基咔唑cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原
DEV glutamate broth DEV谷氨酸鹽肉湯人顱骨造骨細(xì)胞裂解物2,3,4-三氟-6-胺(易制爆)CBFA1/RUNX2 (Ru-related Transcription Factor 2) 成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)
DEV Lactose broth DEV乳糖肉湯人滑膜細(xì)胞裂解物2,3,4-三氟-6-胺(易制爆)CBP(CREB-binding protein) CREB結(jié)合蛋白抗原
DEV Lactose peptone broth DEV乳糖蛋白胨肉湯人髓核細(xì)胞裂解物2-溴-2-基乙酰CBX3/HP1 gamma 染色盒同源物3抗原
Dichloran GlycerolAgar (DG18) Dichloran 甘油瓊脂(DG18)人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞裂解物二氫二磷基-4-異惡唑CBX5(Chromobox Homolog 5) CBX5(多肽)
Dichloran Rose-Bengal Chloramphenicol Agar Dichloran人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞裂解物2,6-二氯-3-吡啶酸CC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗原
HSP27/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記熱休克蛋白-27IgG磷酸化原癌基因CBL24-溴甲二乙基縮Rat TRH (Thyrotropin-Releasing Hormone) 檢測(cè)試劑盒
HSP-105/FITC 熒光素標(biāo)記熱休克蛋白HSP105IgG細(xì)胞分裂周期蛋白74-溴甲二乙基縮Rat TAB (Thyroxine Aibody) 檢測(cè)試劑盒
HSTF2/HSF2 /FITC 熒光素標(biāo)記熱休克轉(zhuǎn)錄因子2IgG磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白257-氮雜吲哚-4-甲R(shí)at T4 (Thyroxine) 檢測(cè)試劑盒
HtrA2/Omi/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸蛋白酶/線粒體絲氨酸蛋白酶IgG細(xì)胞分裂周期蛋白25B7-氮雜吲哚-4-甲R(shí)at TJP1 (Tight Junction Protein 1) 檢測(cè)試劑盒
TRT/FITC 熒光素標(biāo)記端粒酶IgG磷酸化CD2441-芘丁酸Rat TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) 檢測(cè)試劑盒
TRT/TERT/PE 熒光素PE標(biāo)記端粒酶IgG神經(jīng)元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ31-芘丁酸Rat TF (Tissue Factor) 檢測(cè)試劑盒
COX10/FITC 熒光素標(biāo)記COX10IgG3號(hào)染色體開放閱讀框255-溴-2-硝基三氟甲R(shí)at TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) 檢測(cè)試劑盒
IAA/FITC 熒光素標(biāo)記吲哚-3-/植物生長素IgG轉(zhuǎn)錄激活因子MYB5-溴-2-硝基三氟甲R(shí)at TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) 檢測(cè)試劑盒
黃柏探針法PCR鑒定試劑盒N-乙酰-D-氨酸SimpleChIP® Human C/EBPδ Promoter Primers
N'-對(duì)甲苯磺?;?L-精氨酸Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
N-乙酰-L-谷氨酰胺Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
N-乙酰-L-酪氨酸Mitochondrial Dynamics Antibody Sampler Kit
甲基橙(生物染色)Rab6 Antibody
二甲酚橙四鈉鹽PathScan® Phospho-YAP (Ser127) Sandwich ELISA Kit
半二甲酚橙Phospho-DBC1 (Thr454) Antibody
吖啶p53 (DO-7) Mouse mAb
二安替比林NF-κB2 p100/p52 Antibody
分散橙13NF-κB2 p100/p52 Antibody