詳細(xì)介紹
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 月季花染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Flos rosae chinensis |
貨號 | FS-P99199 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
DMEM(高糖),液體遠(yuǎn)志皂苷元L-(-)-半乳糖IRF-1(Ierferon regulatory factor-1) 干擾素調(diào)節(jié)因子抗原
萊苞迪甙A硫酸釓(III)IRAK 2 白介素-1受體相關(guān)激酶2
DMEM(高糖),液體黃芩苷4,6-二甲基嘧啶IL-1RA (Ierleukin-1 receptor aagonist)peptide 白介素-1受體拮抗劑抗原
DMEM(高糖),液體野黃芩苷(燈盞花乙素)(氯甲基)甲基二氯硅烷Iegrin a7(iegrin alpha 7) 整合素α7抗原
DMEM(高糖),干粉黃芩素(氯甲基)甲基二氯硅烷iegrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原
秦皮素2-(2H-Tetrazol-5-yl)-Phenylboronic AcidIegrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原
DMEM(高糖),干粉秦皮甲素2-(2H-Tetrazol-5-yl)-Phenylboronic AcidIegrin alpha V/CD51 peptide 整合素αV抗原
秦皮乙素2-溴-1,3-二氟-5-JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗原
MAP1A/Mtap1a /FITC 熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白1AIgG胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白二酸單乙酯酰氯Porcine ADRP (Adipose Differeiation Related Protein) 檢測試劑盒
MAP1LC3A/FITC 熒光素標(biāo)記自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3IgG酪蛋白激酶casein kinase Iα二酸單乙酯酰氯Porcine HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) 檢測試劑盒
MAP-2/FITC 熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白2IgG磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα(S)-(-)-2,2′,6,6′-四甲氧基-4,4′-雙(二基膦)-3,3′-聯(lián)吡啶Porcine PI3K2α (Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide) 檢測試劑盒
Phospho-MAP2 (Ser136) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化微管相關(guān)蛋白2IgG磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα(S)-(-)-2,2′,6,6′-四甲氧基-4,4′-雙(二基膦)-3,3′-聯(lián)吡啶Porcine PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) 檢測試劑盒
Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化微管相關(guān)蛋白2IgG肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白CAPGPitolisaPorcine GRN (Granulin) 檢測試劑盒
ERK1/MAPK3/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶3IgGⅠ型膠原/1型膠原a12',3'-異叉腺苷Porcine GATA5 (GATA Binding Protein 5) 檢測試劑盒
MAPK4/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶4IgGⅢ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白2',3'-異叉腺苷Porcine TH (Tyrosine Hydroxylase) 檢測試劑盒
Phospho-MARCKS (Ser152/156) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化氨酸蛋白激酶C底物MarcksIgGCD962',3'-異叉鳥苷Porcine GMP-140 (Alpha-granular Membrane Protein) 檢測試劑盒
月季花染料法PCR鑒定試劑盒L-抗壞血酸-2-磷酸三鈉鹽;Vc磷酸酯鈉Desmin (D93F5) XP® Rabbit mAb
IBMX, 3-異丁基-1-甲基Phospho-Histone H3 (Ser10) (D7N8E) XP® Rabbit mAb
鹽酸普魯卡因Phospho-Histone H3 (Ser10) (D7N8E) XP® Rabbit mAb
鹽酸普魯卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (D20G3) XP® Rabbit mAb
伏立諾他雜質(zhì)Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (D20G3) XP® Rabbit mAb
當(dāng)藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)FoxP2 (D55H9) Rabbit mAb
皂素(進(jìn)分)WDR59 (D4Z7A) Rabbit mAb
苦豆堿Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb
松柏Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb
乙酰輔酶A鈉鹽PathScan® Phospho-Tyro3 (panTyr) Sandwich ELISA Kit