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常見細(xì)胞污染類型及預(yù)防辦法2022/1/4
凡混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染，細(xì)胞污染不能*被消除，但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性。本文將簡要介紹幾種常見的細(xì)胞污染類型及處理方法。常見污染類型細(xì)菌污染...
HK-2細(xì)胞出現(xiàn)空泡是正常的嗎？2022/1/4
建系背景人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞系HK-2，取自正常成人腎臟的永生化近端小管上皮，通過轉(zhuǎn)入HPV-16E6/E7基因構(gòu)建而成，并在無血清培養(yǎng)基中持續(xù)生長了一年多。HK-2的生長依賴于表皮生長因子EGF...
認(rèn)識黑膠蟲的真面目（上）2022/1/4
江湖上流傳很久的黑膠蟲，到底真實身份是啥？今天讓我們一起來扒一扒~我們收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進(jìn)行DNA提取、測序、數(shù)據(jù)庫比對，得到了鑒定結(jié)果，一起和大家分享一下吧。表：黑膠蟲檢定微生物種屬樣本...
細(xì)胞的必須檢查，你有做過嗎？2022/1/4
文章描述了一個典型的工作流程，與細(xì)胞操作需要注意的必要步驟，為了成功地應(yīng)用哺乳動物細(xì)胞系，它們必須在受控的條件下生長，并需要自己特定的生長介質(zhì)。此外，為了保證一致性，必須定期監(jiān)測它們的生長情況。當(dāng)細(xì)胞...
IPS細(xì)胞怎么誘導(dǎo)分化？2022/1/4
IPSC生成通常是實現(xiàn)真正的實驗?zāi)繕?biāo)的中間步驟。它一般應(yīng)用于：人胚胎發(fā)育建模；作為難以分離的細(xì)胞來源，用于基礎(chǔ)研究和疾病建模；藥物篩選應(yīng)用；細(xì)胞替代治療。IPS神經(jīng)分化的protocol，以下是神經(jīng)細(xì)...
細(xì)胞凍存相關(guān)實驗操作詳解2021/12/27
一、怎樣凍存動物細(xì)胞?一個實驗室得到一個新的細(xì)胞株后，首先要把該細(xì)胞株培養(yǎng)擴(kuò)增后凍存起來。細(xì)胞凍存首先可以在由于污染等情況丟失細(xì)胞時有備份可用，另外幾乎所有細(xì)胞在培養(yǎng)傳代的過程中發(fā)生一定程度的變異，為...
CaCl2 法制備感受態(tài)細(xì)胞2021/12/24
材料與儀器【器材】1．培養(yǎng)皿2．恒溫培養(yǎng)箱【試劑】1．LB培養(yǎng)基2．選擇性LB瓊脂培養(yǎng)平板（含氨芐青霉素，終濃度為50μg/ml）3．氨芐青霉素100mg/ml4．宿主細(xì)菌：經(jīng)100mmol/LCaC...
牙簽法小量制備質(zhì)粒DNA實驗2021/12/24
原理用牙簽從瓊脂培養(yǎng)基上挑取的菌落可直接用于制備質(zhì)粒DNA。所得的閉合環(huán)狀DNA往往雜質(zhì)太多，不能作為大多數(shù)限制酶的底物。材料與儀器抗生素溴酚藍(lán)溶液EDTA溴化乙錠NSS溶液KCl瓊脂糖凝膠LB、YT...
制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCSCESCEMTris·ClEDTATE乙酸甲RNaseA異丙醇NaCl培養(yǎng)箱離心管轉(zhuǎn)子步驟1.接種一個紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20mlAHC培養(yǎng)基的250ml三角燒瓶...
YAC 克隆的分析實驗 實驗庫 參考來源：2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCYPD甘油培養(yǎng)箱冷凍管步驟1.用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養(yǎng)，直至長出1~3mm大小的紅色菌落為止。2.短期保存：用P...
熒光原位雜交技術(shù)2021/12/24
原理用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行異性結(jié)合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列，因而可以探針直接與染色體進(jìn)行...
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗常見問題詳解2021/12/23
01一般拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么?收到細(xì)胞先不開蓋,用酒精將整個細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時的培...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十七）2021/12/23
細(xì)胞培養(yǎng)問題集錦第十七期，小編會繼續(xù)收集相關(guān)問題，每期都為大家更新5個細(xì)胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~81、▲問：hepg2細(xì)胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒有吹開的細(xì)胞？是不是念珠菌感染？出不來形...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十六）2021/12/23
細(xì)胞培養(yǎng)第十六期來了，今后也會陸續(xù)為大家更新，一起來看看吧~76、▲問：這是酵母菌感染嗎？一般會通過什么途徑污染？答：是酵母菌污染，像圈起來的連體結(jié)構(gòu)就是。一般是環(huán)境和操作等途徑污染。問：用新潔爾滅擦...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十五）2021/12/23
本次更新第十五期細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦，大家一起來看看有沒自己培養(yǎng)細(xì)胞時遇到的問題吧~71、問：凍存細(xì)胞放在4°最多可以放多久呀？如不小心忘記了大概放4°放了3個小時還可以用嗎？答：問題不大，有復(fù)蘇過這...
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