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手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列：逆轉(zhuǎn)錄酶，你真的了解嗎？
手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列：逆轉(zhuǎn)錄酶，你真的了解嗎？通過上期《手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列：如何評(píng)估RNA質(zhì)量？》一文的學(xué)習(xí)。相信大家已經(jīng)獲得了優(yōu)質(zhì)的RNA，即將進(jìn)入逆轉(zhuǎn)錄環(huán)節(jié)。對(duì)于逆轉(zhuǎn)錄，大家都知道它是以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，合成互補(bǔ)DNA(complementaryDNA，cDNA)的過程（如圖1）。但對(duì)于過程中起關(guān)鍵作用的逆轉(zhuǎn)錄酶，可能比較陌生。接下來(lái)，讓小翌給大家介紹下逆轉(zhuǎn)錄酶的相關(guān)理論知識(shí)。圖1.逆轉(zhuǎn)錄過程示意圖逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)1970年美國(guó)科學(xué)家H -
恭喜你~在做分子克隆之前看到了這篇福利好文！分子克隆技術(shù)發(fā)展至今，從經(jīng)典的酶切酶連法到簡(jiǎn)便、快速的同源重組法，同源重組技術(shù)廣受科研小伙伴的青睞！翌圣一步法快速克隆試劑盒（Cat#10911、10912）自上市以來(lái)，受到了眾多小伙伴的支持！好評(píng)如潮！看到各位小伙伴的反饋結(jié)果，小翌按捺不住內(nèi)心的喜悅，要與大家一同分享~一步法快速克隆試劑盒翌圣一步法快速克隆試劑盒是一種利用同源重組的原理，進(jìn)行無(wú)縫克隆的技術(shù)。該技術(shù)無(wú)需考慮酶切位點(diǎn)，將PCR產(chǎn)物定向克隆至任何載體的任何位點(diǎn)，可高效克隆50bp-10kb
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手把手教你做出RT-qPCR最美曲線系列：如何評(píng)估RNA質(zhì)量？在上一期中，小翌闡述了RNA提取過程需注意的關(guān)鍵要點(diǎn)以幫助大家提取到高質(zhì)量的RNA（《一文解鎖RT-qPCR實(shí)驗(yàn)之RNA提取攻略》）。那提取完RNA的質(zhì)量到底如何評(píng)估呢？今天我給大家來(lái)分享一下。評(píng)估RNA的質(zhì)量主要包含三個(gè)方面，分別是RNA的濃度、純度和完整性。RNA濃度評(píng)估首先我們先來(lái)復(fù)習(xí)一下OD260、OD280、OD230的含義。核酸分子所含的嘌呤和嘧啶堿基具有共軛雙鍵，在260nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，因此，核酸的最大吸收波長(zhǎng)為
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一文Get原代細(xì)胞培養(yǎng)秘笈1概述原代細(xì)胞（PrimaryCell）是指從機(jī)體的組織或器官經(jīng)胰蛋白酶、膠原酶、中性蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體環(huán)境培養(yǎng)的細(xì)胞?！鴪D1.原代組織細(xì)胞培養(yǎng)（源于網(wǎng)絡(luò)）那原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別呢？小翌給你答案，見下表：特性原代細(xì)胞細(xì)胞系增殖能力較弱強(qiáng)繁殖代數(shù)一般只能傳10代以內(nèi)無(wú)限增殖，50代左右遺傳物質(zhì)完整性遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)發(fā)生改變生物特性臨床樣本偏離臨床樣本培養(yǎng)容易程度比較復(fù)雜簡(jiǎn)單，易操作原代細(xì)胞培養(yǎng)：由于原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，繁殖一定的代
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單細(xì)胞測(cè)序，不是只有BD和10×Genomics
單細(xì)胞測(cè)序，不是只有BD和10×Genomics單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)指的是通過高通量測(cè)序技術(shù)（NGS，NextGenerationSequencing）分析每一個(gè)單個(gè)細(xì)胞的序列信息，從而更高分辨率地揭示細(xì)胞間的細(xì)胞差異以及其在微環(huán)境中的功能情況。為什么要做單細(xì)胞測(cè)序單細(xì)胞測(cè)序發(fā)展的十余年，使得我們所認(rèn)知的這個(gè)世界越來(lái)越精準(zhǔn)。我們傳統(tǒng)的測(cè)序方法，是在組織水平或者說多細(xì)胞水平上進(jìn)行的，最終得到的數(shù)據(jù)其實(shí)是從多個(gè)或者多類細(xì)胞中得到的平均值，但是無(wú)法明確細(xì)胞異質(zhì)性的信息。而單細(xì)胞測(cè)序，則能夠在更精細(xì)的單個(gè)細(xì)胞 -
1分鐘解鎖兩代轉(zhuǎn)染試劑的差異導(dǎo)讀化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的轉(zhuǎn)染方法，主要包括兩類：陽(yáng)離子脂質(zhì)體和陽(yáng)離子聚合物。在購(gòu)買使用過程中，該如何選擇，他們之間的區(qū)別在哪，小翌來(lái)為大家進(jìn)行簡(jiǎn)要說明。陽(yáng)離子脂質(zhì)體陽(yáng)離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染是目前常用的轉(zhuǎn)染方式之一。其原理是陽(yáng)離子脂質(zhì)體的基本結(jié)構(gòu)由帶正電荷的頭基和一個(gè)或兩個(gè)烴鏈組成，帶正電荷的頭基與帶負(fù)電荷的核酸通過靜電作用形成復(fù)合物，經(jīng)細(xì)胞的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。在DNA與陽(yáng)離子脂質(zhì)體形成lipoplex的過程中，陽(yáng)離子脂質(zhì)體起到復(fù)合和凝集DNA的作用，同時(shí)也
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MolPure® Soil DNA Kit 土壤DNA提取試劑盒簡(jiǎn)介
MolPure®SoilDNAKit土壤DNA提取試劑盒——提取效果媲美進(jìn)口M*品牌20世紀(jì)80年代中期前，微生物學(xué)家通過人工培養(yǎng)的方法研究土壤微生物生態(tài)系統(tǒng)，而可培養(yǎng)的微生物不到總數(shù)的1%，相當(dāng)多的微生物還未被認(rèn)知。隨著宏基因組學(xué)的快速發(fā)展，通過提取土壤微生物總DNA來(lái)研究生態(tài)系統(tǒng)的方法開始出現(xiàn)。然而，土壤是一個(gè)非常復(fù)雜的異質(zhì)體系，其中，含有的腐植酸及腐植酸類似物、酚類化合物、重金屬離子等，在DNA提取過程中如不能有效去除，將直接影響后續(xù)的PCR擴(kuò)增、核酸雜交、內(nèi)切酶消化等分子操作。為了解決這 -
UltraNuclease（全能核酸酶），又稱非限制性核酸內(nèi)切酶、廣譜核酸酶；是一種來(lái)源于SerratiaMarcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶，可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割，將核酸*消化成2-5個(gè)堿基長(zhǎng)度的5'-單磷酸寡核苷酸，能夠在非常廣泛的條件下（6MUrea，0.1MGuanidineHCl，0.4%TritonX-100，0.1%SDS，1mMEDTA，1mMPMSF）降解各種形式的（雙鏈，單鏈，線狀，環(huán)狀，天然或變性）DNA和RNA，廣泛用于去除生物制品中的核酸。本品經(jīng)基因工程改造在
