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  • 基質(zhì)膠實驗應(yīng)用——3D培養(yǎng)

    傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)是在單層中生長,細(xì)胞是扁平并可以在水平面上自由粘附和擴(kuò)散,但不支持在垂直方向上擴(kuò)散,2D表面上培養(yǎng)的細(xì)胞具有強(qiáng)烈的頂端-基底極性,這種極性與某些細(xì)胞類型相關(guān),例如上皮細(xì)胞;3D細(xì)胞培養(yǎng)即三維細(xì)胞培養(yǎng),是指將具有三維結(jié)構(gòu)的不同材料載體與各種細(xì)胞在體外共培養(yǎng),使細(xì)胞在載體的三維立體空間結(jié)構(gòu)中遷移、生長,形成三維的細(xì)胞-載體復(fù)合體,主要用于細(xì)胞球、類器官等培養(yǎng)。圖1.在ECM涂層玻璃或塑料表面(2D)與典型的3DECM之間區(qū)別[1]作為疾病驗證模型,相比于傳統(tǒng)2D疾病模型,以3D為基礎(chǔ)培養(yǎng)
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    干燥試劑如何選擇:風(fēng)干與凍干的區(qū)別干燥試劑的優(yōu)勢隨著人們對健康問題越來越重視,體外診斷(IVD)領(lǐng)域呈快速發(fā)展的趨勢,尤其是的出現(xiàn),更加促進(jìn)了IVD市場的飛速發(fā)展。目前RT-qPCR已被廣泛用于IVD診斷試劑產(chǎn)品開發(fā),但是RT-qPCR液體診斷試劑運輸成本高,性能不穩(wěn)定,保質(zhì)期短。干燥試劑無需冷鏈運輸,可常溫運輸,避免了試劑反復(fù)凍融影響試劑的性能和保質(zhì)期,大幅度降低了運輸?shù)某杀?。不僅方便用戶使用,也降低了對操作人員的要求。圖1.干燥形式的優(yōu)勢常溫運輸及保存是促使干燥試劑引發(fā)分子診斷行業(yè)重點關(guān)注的
  • 造血幫手-集落刺激因子

    造血幫手-集落刺激因子集落刺激因子是一組在體內(nèi)外均可選擇性刺激造血祖細(xì)胞增殖,分化形成某一譜系細(xì)胞集落的細(xì)胞因子,命名為集落刺激因子(CSF)。廣義上,凡是刺激造血的細(xì)胞因子都可統(tǒng)稱為CSF。一.集落刺激因子的分類造血細(xì)胞集落刺激因子(CSF)的研究進(jìn)展迅速,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多種CSF,它們都是糖蛋白,根據(jù)其對造血祖細(xì)胞克隆增殖的作用不同而命名。表1:集落刺激因子的分類表分類細(xì)胞因子受體產(chǎn)生細(xì)胞效應(yīng)多能集落刺激因子multi-CSF,IL-3IL-3R活化的T細(xì)胞刺激造血干細(xì)胞增殖,促進(jìn)肥大細(xì)胞,嗜
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    支原體檢測,快人一步支原體(Mycoplasma)又稱霉形體,是目前發(fā)現(xiàn)小、簡單的原核生物,在實驗室和生物制品工廠在細(xì)胞培養(yǎng)過程中易受到支原體污染,據(jù)文獻(xiàn)報道:支原體污染在儲存細(xì)胞系中發(fā)生率約為15%-35%,在生物制藥行業(yè)中約為0.44%-6.70%[1]。支原體污染后能導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生多種變化(見圖1),因此如何快速的檢測支原體的存在不僅大大降低污染的風(fēng)險,也能為開發(fā)和生產(chǎn)降本增效。圖1:受支原體污染后細(xì)胞出現(xiàn)的相關(guān)狀態(tài)的改變支原體檢測應(yīng)用場景隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展,基于核酸檢測的方法廣泛
  • 關(guān)于高保真聚合酶,你想知道的都在這里

    關(guān)于高保真聚合酶,你想知道的都在這里DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*的組成部分,是參與DNA復(fù)制中的重要酶,被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時間里,從早期被發(fā)現(xiàn)的TaqDNA聚合酶到現(xiàn)在,酶越來越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對舊酶的改造,DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場需求,下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進(jìn)行介紹。圖1.PCR擴(kuò)增的整個檢測過程[1]什么是高保真酶高保真DNA聚合
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    蛋白質(zhì)修飾之——泛素化修飾蛋白質(zhì)的修飾有多種類型,除了常見的無機(jī)和有機(jī)小分子修飾,如磷酸化、糖基化、脂?;龋€有一類用小肽進(jìn)行修飾的,例如泛素化(ubiquitination),類泛素化NEDD化(neddylation)、ISGylation蘇木化(SUMOylation)等。而泛素-蛋白酶體系統(tǒng)則負(fù)責(zé)特異性地降解大多數(shù)細(xì)胞內(nèi)蛋白(約占80%以上),是一種高效蛋白降解途徑。泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種
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    如何選擇合適的二抗二抗是什么?二抗是能和一抗結(jié)合的抗體,即抗體的抗體。主要用于檢測一抗的存在。一抗特異性結(jié)合抗原的,二抗是特異性結(jié)合一抗。即一抗的Fc段或Fab片段可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說,一抗主要是IgG類免疫球蛋白,因此二抗就是抗IgG抗體。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗),如下圖是直標(biāo)一抗。二抗的作用一抗是特異性的結(jié)合目標(biāo)蛋白,一抗需要發(fā)光物質(zhì)或者顯色基團(tuán)標(biāo)記才能被檢測出來,否者一抗和蛋白的結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。
  • 內(nèi)參抗體你選對了嗎?

    內(nèi)參抗體你選對了嗎?各位小伙伴,您是否在蛋白免疫印記時,面對各種內(nèi)參抗體而不知所措呢,內(nèi)參蛋白是生物體內(nèi)管家基因編碼的,在多組織中穩(wěn)定表達(dá),用于驗證免疫學(xué)實驗中是否正常進(jìn)行和一種半定量檢測蛋白表達(dá)的標(biāo)準(zhǔn)對照,那么如何正確的選擇內(nèi)參抗體呢!可以從以下幾點去參考。一、樣本種屬來源1.哺乳動物組織或著細(xì)胞來源的樣本,一般選擇β-actin、α-tubulin、GAPDH、Lamin-B、HistoneH3、Na+/K+-ATPase。2.植物來源樣本,一般選擇plantactin、Rubisco等。3
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