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直接PCR——PCR反應(yīng)中的快速之“王”PCR技術(shù)是一種包括生命科學(xué)在內(nèi)多個(gè)領(lǐng)域頻繁使用的一種技術(shù)。而PCR技術(shù)在發(fā)展過(guò)程中有了幾次大的技術(shù)革新，如熱穩(wěn)定Taq酶的發(fā)現(xiàn)、自動(dòng)控溫PCR儀的推出、PCRmix的出現(xiàn)，每一次革新的出現(xiàn)都使得PCR技術(shù)更加簡(jiǎn)便與易于操作。Part1：直接PCR所謂何意？直接PCR（DirectPCR）是一種不經(jīng)核酸提取而直接使用動(dòng)物或植物組織等直接進(jìn)行擴(kuò)增的反應(yīng)。在許多方面，直接PCR的工作方式類似于常規(guī)PCR。主要區(qū)別是直接PCR中使用的定制緩沖液，樣本可不經(jīng)過(guò)核酸
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精品推薦翊圣核酸清除神器，輕松搞定核酸氣溶膠污染難題聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）是一種體外擴(kuò)增核酸片段的基因檢測(cè)技術(shù)，由于PCR技術(shù)操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，因此被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室因長(zhǎng)期做PCR實(shí)驗(yàn)，環(huán)境中很容易出現(xiàn)核酸（DNA/RNA）懸浮顆粒，這種懸浮顆粒也就是我們常說(shuō)的核酸氣溶膠污染。核酸氣溶膠污染會(huì)導(dǎo)致PCR實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)果不可靠。大家常用的紫外消毒、酒精擦拭等方法，效果并不明顯，這困擾著無(wú)數(shù)實(shí)驗(yàn)人員。翊圣核
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靶標(biāo)伴“His”，蛋白純化明明白白！蛋白純化簡(jiǎn)介蛋白純化是將目標(biāo)蛋白從實(shí)驗(yàn)樣本的總蛋白中分離出來(lái)，同時(shí)仍保留目的蛋白的生物學(xué)活性及化學(xué)完整性。在構(gòu)建載體階段，除了一些必要的表達(dá)元件，還需要考慮的密碼子優(yōu)化以及標(biāo)簽的選擇。選擇合適的標(biāo)簽不但有利于蛋白的純化，促進(jìn)蛋白的可溶性，同時(shí)也不能影響蛋白的結(jié)構(gòu)功能和下游應(yīng)用。以下簡(jiǎn)單列舉幾個(gè)常見(jiàn)蛋白標(biāo)簽：表1不同蛋白純化標(biāo)簽介紹標(biāo)簽大小kDa序列純化效價(jià)標(biāo)簽切除HIS標(biāo)簽~0.84HHHHHH+TEV蛋白酶GST26+3C蛋白酶/PSPMBP42+Facto
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識(shí)破支原體污染，拯救你的細(xì)胞支原體（mycoplasma）是一種沒(méi)有細(xì)胞壁的小原核細(xì)胞。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，支原體污染率達(dá)到60%以上，當(dāng)細(xì)胞（特別是傳代細(xì)胞）被支原體污染后，細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變，污染嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，并出現(xiàn)細(xì)胞病變。因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，防止支原體污染是一個(gè)世界性的難題。圖1支原體污染細(xì)胞后，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變（來(lái)源：該圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）支原體污染細(xì)胞后很難察覺(jué)，同時(shí)若細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程受到了支原體污染，*清除支原體也是非常困難的。因此在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程
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FFPE樣本是什么？做病理的小伙伴對(duì)FFPE樣本肯定不陌生，F(xiàn)FPE（Formalin-FixedａndParrffinEmbedded）樣本是福爾馬林固定石蠟包埋的樣本，固定包埋的方法能夠使組織在常溫保存很長(zhǎng)時(shí)間。早FFPE樣本主要是用于病理形態(tài)學(xué)觀察，近些年，隨著精////準(zhǔn)醫(yī)療的滲透發(fā)展，F(xiàn)FPE樣本在臨床病理檢驗(yàn)、腫瘤基因檢測(cè)中也得到廣泛使用。圖1FFPE樣本人們將FFPE樣本中的核酸提取出來(lái)進(jìn)行建庫(kù)，然后利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)FFPE樣本的核酸進(jìn)行測(cè)序和分析，就能得到病理和腫瘤相關(guān)的很多
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“開(kāi)弓沒(méi)有回頭箭”，核酸質(zhì)量是分子實(shí)驗(yàn)成功的基礎(chǔ)核酸提取是實(shí)驗(yàn)室蕞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)，我們經(jīng)常會(huì)抽提基因組或者總RNA，少則幾份，多則上百份。準(zhǔn)備提取材料，加入TRIzol或裂解液，加入氯////仿、異丙醇，純化柱或手提進(jìn)行核酸沉淀和洗滌、洗脫，半小時(shí)后就可以得到核酸樣本。因?yàn)樘崛?shí)驗(yàn)太平常，以至于我們從來(lái)沒(méi)有思考過(guò)這個(gè)實(shí)驗(yàn)背后的問(wèn)題。大家通常測(cè)濃度、測(cè)比值，而教科書(shū)中已明確告知我們測(cè)出來(lái)數(shù)值（純粹核酸的比值范圍是固定的）代表了核酸品質(zhì)，但偏離標(biāo)準(zhǔn)范圍的數(shù)值往往被忽視，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響往往得不到很好的解釋
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基因測(cè)序的這些年P(guān)art1測(cè)序平臺(tái)的發(fā)展歷程1865年，Sanger提出的雙脫氧末端終止測(cè)序法后對(duì)于基因序列測(cè)定方法具有極///大的推動(dòng)作用。隨后為了彌補(bǔ)一代測(cè)序通量低的缺點(diǎn)，通量更高的二代測(cè)序技術(shù)以及讀長(zhǎng)更長(zhǎng)的三代測(cè)序技術(shù)迅速發(fā)展起來(lái)。在此小翊為大家整理了從一代到三代測(cè)序平臺(tái)以及有代表性測(cè)序儀器的發(fā)展歷程。圖1測(cè)序平臺(tái)的發(fā)展歷程Part2二代測(cè)試的風(fēng)華年代各大公司對(duì)于二代測(cè)序市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)史相當(dāng)激烈的，目前在市場(chǎng)中占有穩(wěn)固地位的主要是Illumina、MGI（華大智造）以及LifeTechnolo
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美國(guó)所謂的“凈網(wǎng)計(jì)劃”，IVD行業(yè)會(huì)不會(huì)是下一個(gè)目標(biāo)？
美國(guó)所謂的“凈網(wǎng)計(jì)劃”，IVD行業(yè)會(huì)不會(huì)是下一個(gè)目標(biāo)？IVD，即體外診斷，是醫(yī)療器械的第—大市場(chǎng)，它主要分為4大賽道：生化診斷、免疫診斷、分子診斷、POCT。其中分子診斷被稱為IVD的黃金賽道，分子診斷技術(shù)的迭代創(chuàng)新，催化了行業(yè)格局日新月異的變化。近些年來(lái)，分子診斷方興未艾，其中二代高通量測(cè)序（NGS）一騎領(lǐng)///先，憑借不斷增加的檢測(cè)通量和日益降低的檢測(cè)成本，帶動(dòng)了臨床應(yīng)用的突破，大大推動(dòng)了分子診斷在遺傳病、病原體、癌基因檢測(cè)等領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展。在腫瘤領(lǐng)域，頭部公司燃石醫(yī)學(xué)、泛生子于今年6月先后
