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外泌體研究歷程,你知多少?外泌體(Exosome)參與細(xì)胞之間的交流,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持、還與疾病息息相關(guān),越來(lái)越多的人做這方面的研究。關(guān)于外泌體提取、組成、“載體”和相應(yīng)功能的精///準(zhǔn)分子機(jī)制近些年越來(lái)越受到關(guān)注,而且發(fā)表的有關(guān)外泌體的文章也在逐年增加。外泌體(Exosome)的研究歷程主要包括外泌體提取與純化、外泌體鑒定與檢測(cè)、外泌體熒光標(biāo)記、和外泌體的蛋白組學(xué)以及下游機(jī)制研究等。下面我們就簡(jiǎn)單介紹一下外泌體的研究歷程。1.什么是外泌體?外泌體(Exosome)是一種由活細(xì)胞
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有了它們,細(xì)胞凋亡檢測(cè)再也不愁細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象,是指在一定的生理或者病理?xiàng)l件下,細(xì)胞主動(dòng)的、高度有序的、自己結(jié)束其生命的過(guò)程。它在生物體的進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個(gè)系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。凋亡過(guò)程中伴隨著細(xì)胞膜、蛋白、DNA等各種變化,可通過(guò)各種手段檢測(cè),具體介紹如下圖所示:圖1細(xì)胞凋亡歷程目前市場(chǎng)上出現(xiàn)多種細(xì)胞凋亡周期檢測(cè)試劑盒,國(guó)外品牌仍占據(jù)著該領(lǐng)域的半壁江山,但價(jià)格昂貴、規(guī)格小、物流慢,一定程度上限制科研進(jìn)程。為了打破這種局面,在國(guó)家大力扶持自主品牌的政策下,多家企業(yè)
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Hifair® Precision sgRNA Synthesis Kit
產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號(hào)規(guī)格價(jià)格(元)Hifair®PrecisionsgRNASynthesisKit11355ES2525T346511355ES5050T645511355ES60100T9945產(chǎn)品描述CRISPR/Cas9是一種由RNA指導(dǎo)Cas核酸酶對(duì)靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù),源于細(xì)菌和古細(xì)菌為應(yīng)對(duì)噬菌體和外源質(zhì)粒的攻擊而演化來(lái)的一種獲得性免疫防御機(jī)制。在現(xiàn)代生物技術(shù)研究中,此系統(tǒng)是通過(guò)人工優(yōu)化的具有引導(dǎo)作用的sgRNA(SingleGuideRNA)引導(dǎo)核酸酶Cas9蛋白在 -
Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit
產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號(hào)規(guī)格價(jià)格(元)Hifair®T7HighYieldRNASynthesisKit10623ES5050T178210623ES60100T3382產(chǎn)品描述Hifair®T7HighYieldRNASynthesisKit進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系的優(yōu)化,試劑盒使用T7RNA聚合酶并以含有T7啟動(dòng)子序列的線型雙鏈DNA為模板,以NTPs為底物,對(duì)啟動(dòng)子下游的DNA序列進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,高效合成單鏈RNA。轉(zhuǎn)錄時(shí)可在底物中加入修飾的核苷酸,制備生物素或染料標(biāo)記的RNA。本試劑盒可以合成長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄 -
精品推薦|您還在為核酸殘留的問(wèn)題而煩惱嗎?核酸殘留是生物樣本制備中常常遇到的問(wèn)題。在蛋白純化的過(guò)程中,如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白純化的得率很低、蛋白檢測(cè)的結(jié)果很差,那么您的樣本可能遭受了核酸殘留的污染。一、快速解決蛋白中核酸殘留問(wèn)題,能帶來(lái)什么收益?(1)契合病毒文庫(kù)構(gòu)建,提高測(cè)序覆蓋率并且研究者提供了一種可獲得HIV測(cè)序文庫(kù)的方案HIV-SMART,其中全能核酸酶的運(yùn)用,可顯著提高HIV病毒測(cè)序覆蓋度,且不影響病毒核酸的回收率。如下圖:圖1(+)添加和(-)不添加全能核酸酶處理的CHU17
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直接PCR——PCR反應(yīng)中的快速之“王”P(pán)CR技術(shù)是一種包括生命科學(xué)在內(nèi)多個(gè)領(lǐng)域頻繁使用的一種技術(shù)。而PCR技術(shù)在發(fā)展過(guò)程中有了幾次大的技術(shù)革新,如熱穩(wěn)定Taq酶的發(fā)現(xiàn)、自動(dòng)控溫PCR儀的推出、PCRmix的出現(xiàn),每一次革新的出現(xiàn)都使得PCR技術(shù)更加簡(jiǎn)便與易于操作。Part1:直接PCR所謂何意?直接PCR(DirectPCR)是一種不經(jīng)核酸提取而直接使用動(dòng)物或植物組織等直接進(jìn)行擴(kuò)增的反應(yīng)。在許多方面,直接PCR的工作方式類似于常規(guī)PCR。主要區(qū)別是直接PCR中使用的定制緩沖液,樣本可不經(jīng)過(guò)核酸
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精品推薦翊圣核酸清除神器,輕松搞定核酸氣溶膠污染難題聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)是一種體外擴(kuò)增核酸片段的基因檢測(cè)技術(shù),由于PCR技術(shù)操作簡(jiǎn)便,靈敏度高,因此被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室因長(zhǎng)期做PCR實(shí)驗(yàn),環(huán)境中很容易出現(xiàn)核酸(DNA/RNA)懸浮顆粒,這種懸浮顆粒也就是我們常說(shuō)的核酸氣溶膠污染。核酸氣溶膠污染會(huì)導(dǎo)致PCR實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,導(dǎo)致結(jié)果不可靠。大家常用的紫外消毒、酒精擦拭等方法,效果并不明顯,這困擾著無(wú)數(shù)實(shí)驗(yàn)人員。翊圣核
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靶標(biāo)伴“His”,蛋白純化明明白白!蛋白純化簡(jiǎn)介蛋白純化是將目標(biāo)蛋白從實(shí)驗(yàn)樣本的總蛋白中分離出來(lái),同時(shí)仍保留目的蛋白的生物學(xué)活性及化學(xué)完整性。在構(gòu)建載體階段,除了一些必要的表達(dá)元件,還需要考慮的密碼子優(yōu)化以及標(biāo)簽的選擇。選擇合適的標(biāo)簽不但有利于蛋白的純化,促進(jìn)蛋白的可溶性,同時(shí)也不能影響蛋白的結(jié)構(gòu)功能和下游應(yīng)用。以下簡(jiǎn)單列舉幾個(gè)常見(jiàn)蛋白標(biāo)簽:表1不同蛋白純化標(biāo)簽介紹標(biāo)簽大小kDa序列純化效價(jià)標(biāo)簽切除HIS標(biāo)簽~0.84HHHHHH+TEV蛋白酶GST26+3C蛋白酶/PSPMBP42+Facto