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qPCR常見問題及解決方案(建議收藏,文末有彩蛋哦~)在RT-qPCR的實驗過程中,大家或多或少都會遇到擴增曲線異常、溶解曲線異常、重復性差等問題。小翊給大家整理了SYBRGreen染料法的常見問題及解決方案,以供大家參考。Part1擴增曲線異常正常的擴增曲線一般呈S型,Ct值///好在20-30之間。異常的擴增曲線包括Ct值偏大、無平臺期、平臺期下降等問題。1.Ct值偏大(如Ct值>30)1)模板量低或基因表達豐度低,建議增加模板量觀察Ct值能否成相應倍數(shù)減少。2)qPCR整個反應條件不適宜或
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保姆式RNA提取試劑盒,打造11min提取神話幾個月前,我們跑了一圈市場,發(fā)現(xiàn)許多朋友對“TRIzol類試劑”提取RNA的方式吐槽的非常激烈,支持和反對的聲音都有:這些言語,每一條都讓我感同身受,沒想到因為一個RNA提取實驗,引發(fā)了很多的思考和討論。說到底,定量實驗是分子實驗的基石,RNA提取又是定量實驗的開端。這種實驗總是會有說不完的辛酸歷史,講不盡的無奈故事。但是,我們想借翊圣生物MolPure®CellRNAKit(培養(yǎng)細胞RNA提取試劑盒),一個集使用簡便、安全無毒與11min超快體驗感
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一夫當關,莫如雙管齊下——聚焦熱啟動TaqDNA聚合酶雙封閉抗體當下基于PCR技術的核酸檢測仍有其應用難點難點→檢測試劑的穩(wěn)定性核酸檢測行業(yè)人都格外關注檢測試劑的穩(wěn)定性,不管是長期儲存穩(wěn)定性還是短期偏離正常保存條件的穩(wěn)定性,都直接影響檢測結果的有效性。而短期偏離正常保存條件的穩(wěn)定性在實際使用和運輸過程中尤為重要,比如遇到樣本量大、適配自動化、排隊等待上機等情況,反應體系需要在室溫或4℃放置,再比如遇到運輸時間長,溫度難以控制,檢測體系就暴露在風險之下。如何保證穩(wěn)定性,如何確保檢測結果有效、可信,
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干貨分享|qPCR復孔平臺期熒光信號不同會影響實驗結果嗎?王老師:您好,近用你們的試劑跑qPCR,復孔平臺期的熒光信號不同,這樣的結果能用嗎?小翊:您好,老師。從圖中來看,復孔重復性是比較好的,△Ct值沒什么問題的。王老師:那為什么復孔的平臺期信號還有相差呢?有什么方法可以使復孔熒光信號一致嗎?近有不少客戶咨詢小翊類似的問題,擔心這樣的數(shù)據(jù)不可靠今天小翊就幫您解除疑慮!復孔平臺期不同不會影響實驗結果(△Ct0.5)*,理想的PCR擴增是使DNA分子由1變2,2變4,以2n進行擴增的。但實際上,隨
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高品質、高成功率動物腸炎建模用Yeasen葡聚糖硫酸鈉鹽穩(wěn)定、高效,物有所值!葡聚糖硫酸鈉鹽(dextransulfatesodiumsalt,DSS)是葡聚糖的聚陰離子衍生物,由葡聚糖和氯//磺//酸的酯化反應形成,白色粉末,在水或鹽溶液中溶解得到澄清溶液翊圣生物利用*的生產工藝開發(fā)的DSS包含了分子量1,500~500,000Da范圍內的多個產品,硫含量17-19%。其中分子量為36000-50000Da的DSS產品,可根據(jù)實驗目的調整DSS濃度和給藥時間,建立急性、慢性和急慢性交替性模型。
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Carrier RNA常見類型、作用原理及優(yōu)缺點介紹
CarrierRNA常見類型、作用原理及優(yōu)缺點介紹1.CarrierRNA概念及作用熒光定量PCR是分子診斷主流技術,包括核酸提取和PCR擴增兩個環(huán)節(jié),兩者共同決定了該檢測方法的評測參數(shù)。以直觀關鍵的檢測靈敏度指標來看,只有實現(xiàn)了提取環(huán)節(jié)///優(yōu)化和PCR擴增環(huán)節(jié)///優(yōu)化的情況下,檢測靈敏度的結果才更可信。檢測靈敏度顯示了檢測試劑的檢測下限,對于熒光定量PCR而言,即一定樣本濃度下的病毒核酸檢出率。CarrierRNA,中文名載體RNA,又叫核酸助沉劑。在核酸提取環(huán)節(jié),提取使用到的離心管壁多是 -
無需gDNA提取的基因分型產品,您值得擁有!基因分型是通過使用生物學試驗檢查個體的DNA序列的過程,也是將目標序列與另一個體的序列或參考序列進行比較來確定個體的基因型差異的過程。PCR是一種常見的基因分型方法,用于檢測轉基因研究確定目標基因是否存在?;赑CR方法的基因分型一般需要處理樣本,抽提純化基因組DNA。當待測樣本較多時,抽提純化基因組gDNA的過程費時、操作重復,通量低并且實驗成本高。為了解決樣本抽提純化這一難題,翊圣生物通過改造TaqDNA聚合酶,優(yōu)化PCR反應體系開發(fā)出無需基因組純
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轉染效率低?小翊手把手教你做轉染實驗細胞膜是由磷脂雙分子層和鑲嵌蛋白組成的,帶有負電荷。因此帶有負電荷的DNA或RNA無法通過細胞膜。為了讓核酸(DNA或RNA)通過細胞膜,研究人員利用不同的方法,包括使用化學物質和包被核酸的載體分子進行中和,以及在細胞膜上開孔等物理方法,將核酸(DNA或RNA)直接運輸?shù)郊毎麅?。這些就是轉染的過程,轉染的目的是促進蛋白合成,調節(jié)基因表達,促進細胞生長與發(fā)育等,目前越來越多地被用到功能研究中。圖1DNA/RNA轉染過程(圖片來源:圖片來源于網絡)1.常見轉染方法