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貼壁細胞培養(yǎng)2021/10/29
材料與儀器凍存細胞70%乙醇PBS胰酶/EDTA25cm2和150cm2組織培養(yǎng)瓶CO2培養(yǎng)箱實驗步驟1.將含有凍存細胞的安瓿放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸...
懸浮細胞培養(yǎng)2021/10/29
材料與儀器凍存HeLaS3細胞70%乙醇*MEM-10胰酶/EDTA旋轉(zhuǎn)瓶*培養(yǎng)基-525cm2組織培養(yǎng)瓶C02培養(yǎng)箱SorvallH-6000A轉(zhuǎn)子100ml或200ml通氣旋轉(zhuǎn)瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗...
細胞培養(yǎng)技術2021/10/29
簡介一.細胞培養(yǎng)的基本原理細胞培養(yǎng)是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞,用培養(yǎng)基制成細胞懸液,在體外適宜條件下,使細胞生長繁殖,并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)主要不同點在于...
MDCK細胞培養(yǎng)2021/10/29
簡介一、目的MDCK細胞培養(yǎng)是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員,必須按照本文件相關的操作規(guī)程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員。三、程序(一)生物安全要求實驗...
雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟2021/10/26
材料與儀器:原代培養(yǎng)胚胎14天大鼠端腦細胞,F(xiàn)ITC,TRITC實驗步驟:雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟若在同一標本中有兩A和B種抗原需要同時顯示,A抗原的抗體用FITC標記,B抗原的抗體用TRI...
免疫熒光(Immunofluorescence, IF)實驗方法2021/10/26
材料與儀器:免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據(jù)抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的...
免疫熒光技術-間接法2021/10/26
材料與儀器:抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟:1.標本固定后,PBS洗滌3x3分鐘;2.滴加一抗,37℃40分鐘或4℃過夜;3.PBS洗3x3分鐘;4.滴加熒光標記二抗37℃,40分鐘;5.PBS洗3...
免疫熒光技術-直接法2021/10/26
材料與儀器:抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟:1.標本經(jīng)固定后,PBS洗滌3×3分鐘;2.加熒光素標記的抗體,濕盒內(nèi)37℃孵育50分鐘;3.PBS洗滌3×3分鐘;4.0.1%伊文氏蘭復染;5.PBS洗...
冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處是什么?2021/10/26
冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關鍵取決于所要檢測的抗原穩(wěn)定性,有的抗原不穩(wěn)定,經(jīng)過組織固定,脫水、透明、浸蠟...
細胞不長,這些方面您注意了嗎?2021/10/25
Q1培養(yǎng)液pH對細胞生長的影響?答:由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產(chǎn)生有害的影響,目前也有些無血清培養(yǎng)基或者轉(zhuǎn)染用的培養(yǎng)基PH值會在6.5左右。因為各種細胞對pH的...
NGS建庫人都在用的文庫質(zhì)量評定方法,你都知道嗎?2021/10/25
高通量測序(NextGenerationSequencing,NGS)近年來飛速發(fā)展,在各個領域已被廣泛應用。而文庫的制備是NGS技術中極為重要的步驟。所謂文庫制備(LibraryPreparatio...
病原微生物提取的方法有哪些?2021/10/25
數(shù)據(jù)統(tǒng)計據(jù)WHO統(tǒng)計,全球感染性疾病導致的患者死亡占全部死因的25%以上,在中國,感染性疾病占所有疾病的50%以上,75%造血系統(tǒng)腫瘤患者和50%實體腫瘤患者死于感染,膿毒癥(嚴重感染)患者病死率高達...
常見的DNA損傷類型有哪些?2021/10/25
說起DNA損傷修復,相信大家都很熟悉,但小編今日還是要跟大家再嘮嘮這個話題,講講在二代建庫中,如果DNA存在損傷,那常見的損傷類型有哪些呢?而這些損傷又是如何進行修復的呢?損傷的形成常見的DNA損傷有...
化學感受態(tài)細胞進行質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化的原理2021/10/25
背景介紹將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化入細菌的過程稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化通常有兩種方法:化學轉(zhuǎn)化法和電穿孔法。電穿孔法的轉(zhuǎn)化率高達109~1010個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,轉(zhuǎn)化率比化學轉(zhuǎn)化法高,當可能得到的每一個克隆都非常...
ELISA雙抗體夾心法2021/10/22
簡介ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體...

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