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細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)2021/10/29
簡介一.細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理細(xì)胞培養(yǎng)是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細(xì)胞，用培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液，在體外適宜條件下，使細(xì)胞生長繁殖，并保留其一定的結(jié)構(gòu)和功能特性。細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)主要不同點在于...
MDCK細(xì)胞培養(yǎng)2021/10/29
簡介一、目的MDCK細(xì)胞培養(yǎng)是分離流感病毒及相關(guān)研究實驗的基本技術(shù)。疾控中心的所有技術(shù)人員，必須按照本文件相關(guān)的操作規(guī)程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術(shù)人員。三、程序（一）生物安全要求實驗...
雙重染色法免疫熒光組織化學(xué)染色步驟2021/10/26
材料與儀器：原代培養(yǎng)胚胎14天大鼠端腦細(xì)胞，F(xiàn)ITC，TRITC實驗步驟：雙重染色法免疫熒光組織化學(xué)染色步驟若在同一標(biāo)本中有兩A和B種抗原需要同時顯示，A抗原的抗體用FITC標(biāo)記，B抗原的抗體用TRI...
免疫熒光（Immunofluorescence, IF）實驗方法2021/10/26
材料與儀器：免疫熒光技術(shù)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)。它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光基團，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的...
免疫熒光技術(shù)-間接法2021/10/26
材料與儀器：抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟：1.標(biāo)本固定后，PBS洗滌3x3分鐘；2.滴加一抗，37℃40分鐘或4℃過夜；3.PBS洗3x3分鐘；4.滴加熒光標(biāo)記二抗37℃，40分鐘；5.PBS洗3...
免疫熒光技術(shù)-直接法2021/10/26
材料與儀器：抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實驗步驟：1.標(biāo)本經(jīng)固定后，PBS洗滌3×3分鐘；2.加熒光素標(biāo)記的抗體，濕盒內(nèi)37℃孵育50分鐘；3.PBS洗滌3×3分鐘；4.0.1%伊文氏蘭復(fù)染；5.PBS洗...
冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處是什么？2021/10/26
冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片，而有的一抗只能做冰凍切片，關(guān)鍵取決于所要檢測的抗原穩(wěn)定性，有的抗原不穩(wěn)定，經(jīng)過組織固定，脫水、透明、浸蠟...
細(xì)胞不長，這些方面您注意了嗎？2021/10/25
Q1培養(yǎng)液pH對細(xì)胞生長的影響？答：由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對細(xì)胞生長將產(chǎn)生有害的影響，目前也有些無血清培養(yǎng)基或者轉(zhuǎn)染用的培養(yǎng)基PH值會在6.5左右。因為各種細(xì)胞對pH的...
NGS建庫人都在用的文庫質(zhì)量評定方法，你都知道嗎？2021/10/25
高通量測序（NextGenerationSequencing，NGS）近年來飛速發(fā)展，在各個領(lǐng)域已被廣泛應(yīng)用。而文庫的制備是NGS技術(shù)中極為重要的步驟。所謂文庫制備（LibraryPreparatio...
病原微生物提取的方法有哪些？2021/10/25
數(shù)據(jù)統(tǒng)計據(jù)WHO統(tǒng)計，全球感染性疾病導(dǎo)致的患者死亡占全部死因的25%以上，在中國，感染性疾病占所有疾病的50%以上，75%造血系統(tǒng)腫瘤患者和50%實體腫瘤患者死于感染，膿毒癥（嚴(yán)重感染）患者病死率高達...
常見的DNA損傷類型有哪些？2021/10/25
說起DNA損傷修復(fù)，相信大家都很熟悉，但小編今日還是要跟大家再嘮嘮這個話題，講講在二代建庫中，如果DNA存在損傷，那常見的損傷類型有哪些呢？而這些損傷又是如何進行修復(fù)的呢？損傷的形成常見的DNA損傷有...
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞進行質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化的原理2021/10/25
背景介紹將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化通常有兩種方法：化學(xué)轉(zhuǎn)化法和電穿孔法。電穿孔法的轉(zhuǎn)化率高達109～1010個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA，轉(zhuǎn)化率比化學(xué)轉(zhuǎn)化法高，當(dāng)可能得到的每一個克隆都非常...
ELISA雙抗體夾心法2021/10/22
簡介ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體...
蛋白質(zhì)免疫印跡實驗方法原理步驟及注意事項2021/10/22
蛋白質(zhì)免疫印跡（WesternBlot|WB）實驗方法原理步驟及注意事項一：蛋白提取1、組織蛋白提取1）所需器材：制冰機、標(biāo)記筆、兩套1.5mlEP管（最好高溫高壓處理）、一個大冰盒、一個1.5mlE...
非基因組DNA的提取2021/10/22
一、DNA提取方法簡介1、基因組DNA的提取1.1、CTAB法1.2、SDS法1.3、其它2、非基因組DNA的提取2.1、質(zhì)粒DNA的提取2.1.1、堿裂解法2.1.2、煮沸法2.2、線粒體、葉綠體D...
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