西安昊興生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備經(jīng)驗(yàn)之談2021/8/19
細(xì)菌處于容易接受外源DNA的狀態(tài)稱之為感受態(tài)，通過(guò)物理或化學(xué)的方法，人工誘導(dǎo)細(xì)菌細(xì)胞成為敏感的感受態(tài)細(xì)胞是重組DNA轉(zhuǎn)化細(xì)菌技術(shù)的關(guān)鍵。制備出感受態(tài)細(xì)胞，我們就可以方便的將需要克隆的質(zhì)粒導(dǎo)入其中，使其...
CRISPR/cas9 基因編輯技術(shù)2021/8/16
CRISPR/Cas系統(tǒng)是原核生物的一種天然免疫系統(tǒng)，存在于大多數(shù)細(xì)菌和古生菌中。原核生物在遭到病毒入侵后，能夠把病毒DNA的一小段提取出來(lái)并存儲(chǔ)到自身基因組上的特定區(qū)域，我們把這個(gè)區(qū)域稱為CRISP...
小動(dòng)物活體成像技術(shù)2021/8/13
分子成像的發(fā)展：1999年，美國(guó)哈佛大學(xué)Weissleder等人提出了分子影像學(xué)（molecularimaging）的概念——應(yīng)用影像學(xué)方法，對(duì)活體狀態(tài)下的生物過(guò)程進(jìn)行細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究。...
質(zhì)粒提取竅門2021/8/12
提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種，從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取，從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取，從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法等，各種不同的方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)，根...
RNA免疫共沉淀技術(shù)2021/8/12
RNA免疫共沉淀（RNAimmunoprecipitation，RIP）是一種基于抗體的技術(shù)，用于定位體內(nèi)的RNA-蛋白質(zhì)相互作用。將所關(guān)注的RNA結(jié)合蛋白(RBP)與其結(jié)合的RNA一起進(jìn)行免疫沉淀，...
細(xì)胞凋亡檢測(cè)2021/8/11
細(xì)胞凋亡（apoptosis）指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程，而是主動(dòng)過(guò)程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用，它并...
細(xì)胞周期的分析2021/8/11
細(xì)胞周期（cellcycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過(guò)程，分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2...
蛋白磷酸化檢測(cè)的注意事項(xiàng)2021/8/2
1、樣本準(zhǔn)備過(guò)程中防止蛋白質(zhì)降解和保留翻譯后修飾樣本準(zhǔn)備過(guò)程中，細(xì)胞會(huì)釋放蛋白酶和/或去磷酸化酶，為了減少這些酶的活性，處理樣本的過(guò)程應(yīng)在冰上進(jìn)行，并預(yù)先冷卻所有緩沖液，并且建議用含蛋白酶和磷酸酶抑制...
Western blot之蛋白轉(zhuǎn)印二三事2021/8/2
蛋白轉(zhuǎn)印的方法蛋白轉(zhuǎn)印可選擇傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)、半干轉(zhuǎn)或快速半干轉(zhuǎn)方法。濕轉(zhuǎn)系統(tǒng)：適用于大多數(shù)各種分子量的常規(guī)蛋白轉(zhuǎn)印。轉(zhuǎn)印過(guò)程中凝膠和膜被浸入充滿轉(zhuǎn)印緩沖液的槽中。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)：凝膠和膜被夾在預(yù)先潤(rùn)濕緩沖液的濾...
實(shí)驗(yàn)室里的不明瓶瓶罐罐不要隨意洗！??！2021/7/30
中山大學(xué)藥學(xué)院于7月27日發(fā)布通報(bào)，該院2021年7月27日發(fā)生一起實(shí)驗(yàn)安全事故，實(shí)驗(yàn)=室在清理通風(fēng)柜時(shí)發(fā)現(xiàn)之前畢業(yè)生遺留在燒瓶?jī)?nèi)的未知白色固體，一博士研究生用水沖洗時(shí)發(fā)生炸裂，炸裂產(chǎn)生的玻璃碎片刺破...
吃東西是為了饑餓還是為了享樂？原來(lái)它們的腦回路并不相同2021/7/29
研究人員發(fā)現(xiàn)，盡管大腦通過(guò)中腦產(chǎn)生5-羥色胺的神經(jīng)元來(lái)調(diào)節(jié)快感和饑餓感的進(jìn)食，但每種進(jìn)食方式都是由自己獨(dú)立的電路連接的，不影響其他類型的進(jìn)食方式。美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心(CentersforDisea...
重組DNA的構(gòu)建（載體構(gòu)建）2021/7/29
基本原理：外源目的DNA與載體分子的連接稱為DNA重組，重組的DNA稱為重組體或重組子。研究中需要克隆或表達(dá)的基因?yàn)橥庠碊NA，載體是指能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并在其中進(jìn)行擴(kuò)增或誘導(dǎo)外源基因表達(dá)...
CCK8法測(cè)定細(xì)胞增殖注意事項(xiàng)2021/7/29
CCK8全稱CellCountingKit-8，是一種基于WST-8（化學(xué)名為2-（2-甲氧基-4-硝基苯）-3-（4-硝基苯）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽）的應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性...
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)2021/7/28
基本原理細(xì)胞凍存時(shí)保存細(xì)胞的最基本方法，當(dāng)不加保護(hù)劑直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水會(huì)形成冰晶，從而引起細(xì)胞死亡。因此，正常情況下凍存細(xì)胞，通常會(huì)向培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑，使用逐步降低溫度的方法，以減...
干貨分享--WB實(shí)驗(yàn)問題總結(jié)與處理方案（三）2021/7/27
41、跑電泳的時(shí)候配的膠總是“縮”是什么原因呢？是有的成分不對(duì)嗎？答：沒什么問題，就是你膠里的水分被蒸發(fā)了。過(guò)夜時(shí)拿保鮮膜包起來(lái)，在里面加點(diǎn)水保持濕度就可以了；也可能母液（30%聚丙酰胺）有問題，你可...
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