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PCR數(shù)據(jù)處理秘籍：干貨滿滿，看完還想再來一篇！
通常我們做完熒光定量PCR后，會通過下機(jī)數(shù)據(jù)來分析基因表達(dá)情況。這篇干貨將會給大家詳細(xì)分享熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理方法，希望能給小伙伴們一定的幫助。相對定量法中常見的是比較Ct法，其中主要包括△△Ct法，Pfaffl法和△CT法，目前諸多科研人員采用最多的是△△Ct法。雖然該方法應(yīng)用廣泛，但是很多人卻不了解其中的原理。知其然，知其所以然。小翌接下來給小伙伴們講一下△△Ct法的原理?！鳌鰿t法原理Ct值：每個反應(yīng)管中熒光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時所需要的循環(huán)數(shù)。起始模板拷貝數(shù)越多，Ct值則越小。理論條 -
01無血清培養(yǎng)細(xì)胞體外培養(yǎng)時需要在培養(yǎng)基中加入血清，以維持細(xì)胞的生長和存活。而血清，尤其是牛血清，成分復(fù)雜、批間差大和存在病原體污染的可能性，不確定的動物源性對細(xì)胞培養(yǎng)會帶來顯著的外源物質(zhì)污染風(fēng)險，因此科研人員對無血清培養(yǎng)基的需求日益增加，目前無血清培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)、單抗、活性蛋白等生物制品和細(xì)胞治療等的領(lǐng)域中。無血清培養(yǎng)基中不含血清，為能夠?qū)崿F(xiàn)與含血清培養(yǎng)基相似的維持和促進(jìn)細(xì)胞生長的功能，其中必須添加白蛋白(Albumin)、胰島素(Insulin)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)
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干貨 | 基因編輯探秘系列之在細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域的應(yīng)用
2023年11月16日，VertexPharmaceuticals和CRISPRTherapeutics共同宣布基因編輯療法產(chǎn)品CASGEVY™（Exagaglogeneautotemcel）獲英國藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)MHRA有條件批準(zhǔn)上市，用于治療治療鐮狀細(xì)胞?。⊿CD）和輸血依賴性β-地中海貧血（TDT），是獲批上市的CRISPR基因編輯藥物，12月8日，美國食品和藥物管理局（FDA）也批準(zhǔn)了該基因編輯治療藥物。這是基因編輯治療里程碑事件，代表著一項重大的科學(xué)進(jìn)步可以讓數(shù)以萬計的患者受益。圖1.CA -
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，“黑膠蟲”污染常常成為一大難題，“黑膠蟲”及其分解的復(fù)合物是一種細(xì)胞體外培養(yǎng)時常見的細(xì)胞污染物。它在普通倒置顯微鏡的低倍鏡下呈現(xiàn)點狀或碎片狀的黑色顆粒，在高倍鏡下可看到這些黑色顆粒進(jìn)行原地振動（類似布朗運動）。想要告別黑膠蟲污染，首先需要準(zhǔn)確識別污染類型。一旦確認(rèn)為黑膠蟲污染，便可以采取相應(yīng)的措施，使用黑膠蟲清除劑（60725ES）來解決問題。01判斷黑膠蟲污染的方法01培養(yǎng)基不渾濁，但在顯微鏡下觀察細(xì)胞時，細(xì)胞周圍和培養(yǎng)液中有很多小黑點，且隨著培養(yǎng)時間的延長小黑點逐漸增多，更
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N6-甲基腺苷（m6A）是高等真核生物信使RNA（mRNA）內(nèi)部豐富的修飾，與人類的發(fā)育，免疫，腫瘤生成和轉(zhuǎn)移，干細(xì)胞更新，脂肪分化等過程息息相關(guān)，目前m6A甲基化修飾已成為科研中一個重要且熱門的研究方向，因此，開發(fā)m6A甲基化的檢測方法也尤為重要。甲基化RNA免疫共沉淀高通量測序(MeRIP-seq/m6A-seq)是目前研究m6A甲基化修飾使用廣泛的技術(shù)之一。該技術(shù)利用特異性識別m6A甲基化修飾的抗體，對細(xì)胞內(nèi)具有m6A甲基化修飾的RNA片段進(jìn)行免疫共沉淀。然后，對沉淀下來的RNA片段進(jìn)行高
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革新之作！高效多功能，新一代無血清添加劑（NSC-27/N-2）來了！
B27和N-2都屬于無血清添加劑，其中B27(以下稱NSC-27)是由南伊利諾伊大學(xué)醫(yī)學(xué)院GregoryBrewer博士等人【1】于1993年優(yōu)化其早期無血清培養(yǎng)基配方而得【2】，NSC-27是一種專門用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充添加劑，常與Neurobasal培養(yǎng)基或Neurobasal-A培養(yǎng)基配合使用，以便在無血清條件下支持神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)。NSC-27添加劑包含了細(xì)胞生長所必需的各種生長因子、激素、神經(jīng)營養(yǎng)因子、維生素和礦物質(zhì)等成分，這些成分有助于模擬體內(nèi)環(huán)境，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的存活、分化和功能表達(dá) -
上新 | 想要動物組織/細(xì)胞RNA提取又快又好？看這里！
表1.RNA的結(jié)構(gòu)和功能時間樣本類型濃度（ng/µl）濃度均值（ng/µl）260/280260/230對照（常溫）鼠肝301.26307.392.011.97313.522.011.97鼠腎284.60294.542.012.14304.472.012.0950℃熱加速14天鼠肝346.60328.712.011.95310.812.011.97鼠腎293.46294.302.002.09295.132.001.99RNA研究的第一步為RNA提取，高質(zhì)量的RNA是進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序、RT-PCR等 -
上新 | 操作簡單、快速準(zhǔn)確！腺相關(guān)病毒(AAV)定量檢測試劑盒強(qiáng)勢登場！
基因治療作為一種新興療法，是向靶細(xì)胞引入正常有功能的基因，以糾正或補(bǔ)償致病基因所產(chǎn)生的缺陷，從而達(dá)到治療疾病的目的。目前大多數(shù)基因治療應(yīng)用的仍是病毒載體，這些病毒載體經(jīng)過改造后，已經(jīng)不具有致病性。廣泛應(yīng)用的病毒載體包括腺病毒載體（ADV）、慢病毒載體（LV）、單純皰疹病毒載體（HSV）、痘病毒載體（PV）及腺相關(guān)病毒載體（AAV）。作為遞送基因療法的有力工具，AAV是目前在研基因療法項目中應(yīng)用最為廣泛的病毒載體。以AAV載體為代表的基因治療藥物能修正遺傳病患者的基因缺陷，給一些遺傳性罕見病、神經(jīng)
