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漲知識|qPCR專場八：細節(jié)-認真的態(tài)度和科學的精神
漲知識|qPCR專場八：細節(jié)-認真的態(tài)度和科學的精神熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗需要用心對待，各種細小的偏差都會導致實驗出現(xiàn)結(jié)果不準確或難以理解的現(xiàn)象。小事成就大事，細節(jié)成就。接下來小翌給大家來介紹一下熒光定量PCR中需要注意的小細節(jié)。RNA保證可用RNA的完整度在很大程度上 -
精品推薦|miRNA的定量分析，這里有方案！MicroRNAs（miRNAs）是一種大小約21-28個堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成。miRNA主要與靶基因mRNA3‘端非編碼區(qū)域特異性結(jié)合，調(diào)控轉(zhuǎn)錄后靶基因mRNA的翻譯過程，從而阻斷mRNA翻譯和促進mRNA降解導致蛋白質(zhì)表達降低。miRNA的作用涉及個體發(fā)育、組織分化、細胞增殖和細胞凋亡等多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展。圖.miRNA體內(nèi)合成示意miRNA研究的關(guān)鍵是如何
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想快速區(qū)分不同胰蛋白酶？這三點是關(guān)鍵！胰蛋白酶大致可以分為兩種，一種是傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶，普遍發(fā)現(xiàn)于脊椎動物消化系統(tǒng)，直接提取自?；蜇i的胰腺組織；另一種則是非動物源性胰蛋白酶，即利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。01應用區(qū)別胰蛋白酶理化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，通過多重結(jié)晶方式純化，并進一步采取層析及超濾技術(shù)制備而得。該酶易溶于水，不溶于、乙醇、等有機溶劑。在pH1.8時，酶短時間煮沸幾乎不失活，在堿溶液中加熱則會變性沉淀。Ca2+對酶有保護和激活作用，胰蛋白酶的等電點為
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國際期刊 ┃ 翌圣克隆試劑盒助力浙大團隊揭示病原菌宿主適應新機制
國際期刊┃翌圣克隆試劑盒助力浙大團隊揭示病原菌宿主適應新機制2023年9月2日，浙江大學樂敏課題組在NationalScienceReview（IF=20.600）上發(fā)表研究論文“GenomedegradationpromotesSalmonellapathoadaptationbyremodelingfimbriae-mediatedproinflammatoryresponse”，該論文使用翌圣一步法快速克隆試劑盒（Cat#10911）構(gòu)建菌毛基因缺失株，以禽宿主專性病原——雞白痢沙門菌為模 -
上新|雙鏈甲基化建庫重磅上市，助力表觀遺傳學研究01表觀遺傳1942年，ConradWaddington創(chuàng)造出了“表觀遺傳學”一詞，用以定義基因型未發(fā)生改變而表型改變的現(xiàn)象，以解釋發(fā)育的各個方面。大約3/4個世紀以后，我們發(fā)現(xiàn)基因表達模式傳遞的表觀遺傳機制并不依賴于DNA序列的改變，而是通過改變?nèi)旧|(zhì)的狀態(tài)，而染色質(zhì)狀態(tài)同時是我們遺傳信息的生理學形式。表觀遺傳的調(diào)控機制包括多種方式，圖1主要介紹其中的3種：DNA甲基化、組蛋白修飾（圖1中顯示乙?；图谆揎棧┖头蔷幋aRNA導的調(diào)控。02表觀遺
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新品│高效尿嘧啶特異性切割酶：精準清除dU堿基！Uracil-SpecificExcisionReagent是由尿嘧啶DNA糖基化酶（UracilDNAGlycosylase,UDG）和核酸內(nèi)切酶Ⅷ(EndonucleaseVIII,EndoⅧ)（戳鏈接了解詳情）兩種酶混合而成。UDG識別ssDNA或dsDNA上的dU堿基并形成AP位點，但磷酸二酯骨架結(jié)構(gòu)保持完整。EndoVIII的裂解酶活性能夠使AP位點的3′和5′端的磷酸二酯鍵斷裂，釋放無堿基的脫氧核糖，形成單核苷酸間隙。因此，Uracil
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漲知識 | qPCR專場六：一文讀懂qPCR文章金標準-MIQE
熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實驗過程中，我們需要注意諸多細節(jié)，謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實驗，拿到實驗結(jié)果，發(fā)表高分文章，走上人生巔呢？日常在進行qPCR時，需要注意多個操作細節(jié)，有時稍不留意就會 -
膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜、腸道中含量豐富，彈性較好；IV型在晶狀體中含量豐富；V型主要分布在皮膚和血管壁中等。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學上有不同類型，膠原蛋白由三個自身按左螺旋排列的多肽鏈構(gòu)成，三條相互獨立的膠原蛋白肽鏈依靠甘氨酸之間形成的氫鍵維系三股螺旋相互纏繞的結(jié)構(gòu)[1]。商業(yè)上有天然和人工合成兩種不同的生產(chǎn)路徑，在醫(yī)療、美容、醫(yī)學和科學研究領(lǐng)域有
