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說到RNA提取,總是避不開Trizol(此處指總RNA抽提試劑,下同),作為總RNA提取的方法,裂解能力強,適用范圍廣,適用動植物組織還有小量樣本及難提取的組織,例如皮膚,結締組織,還可以用于細菌真菌等微生物的總RNA提取,優(yōu)點顯而易見,缺點也是不容忽視,Trizol它離不開氯仿?。÷确略缭?017年就被世衛(wèi)癌癥研究機構列入2B類致癌清單了,吸入,食入,皮膚吸收,主要作用于中樞神經,有麻醉作用,對心、肝、腎有損害,還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險品,刺激眼睛、呼吸道粘膜,引起慢性咽炎,經皮膚、吞
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常用報告基因有哪些種類?一文讀懂!什么是報告基因?報告基因(reportergene)是一種編碼在內源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質或酶的基因。報告基因與目的基因或調控序列相連,通過間接或直接檢測報告基因編碼產物的信號,比如報告蛋白、mRNA、酶等,直觀反映細胞內基因的轉錄活性或表達水平。一般報告基因的特點是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報告基因編碼產物的半衰期是比較關注的一個關鍵點。編碼產物半衰期和報告基因的應用領域息息相關。[1]那么報告基因該如何選擇呢?在選擇報告基因時一般
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漲知識|qPCR專場四:問題圖表分析及實驗案例熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經常是差之毫厘謬以千里,所以在實驗過程中,我們需要注意諸多細節(jié),謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實驗,拿到實驗結果,發(fā)表高分文章呢?在熒光定量PCR實驗中,難
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新品│Endonuclease VIII:精準切割DNA受損堿基,助力基因損傷修復研究
新品│EndonucleaseVIII:精準切割DNA受損堿基,助力基因損傷修復研究核酸內切酶Ⅷ(EndonucleaseVIII,EndoⅧ)是一種具有N-糖基化酶活性(N-glycosylase)和AP-裂解酶(AP-lyase)活性的DNA損傷修復酶,參與氧化產生的DNA損傷的堿基切除修復。作用原理EndonucleaseVIII識別雙鏈DNA上受損堿基并在其N-糖基化酶活性作用下切除雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基,產生一個脫嘌呤(AP)位點。隨后,在其AP裂解酶活性作用下切割AP位點的3'和 -
超低殘留分子酶,病原檢測和生物制品質控試劑盒開發(fā)利器!
精品推薦|UCF.ME超低殘留分子酶,病原檢測和生物制品質控試劑盒開發(fā)利器!近年來全球感染性疾病的發(fā)病率有所上升,病原體呈現(xiàn)多樣化和復雜化的發(fā)展趨勢,半數(shù)患者存在病原體不明的困境,病原體的快速診斷面臨嚴峻挑戰(zhàn)。目前用于臨床病原體檢測的方法主要包括傳統(tǒng)培養(yǎng)法、PCR法、宏基因組測序(mNGS)、病原靶向測序(tNGS)等。新冠核酸檢測讓熒光PCR技術大放異彩,新冠之后mNGS因抗疫揚名,一度被臨床醫(yī)生所青睞,逐步走向尋常百姓家。tNGS靶向測序技術更是異軍突起,以其對“PCR”和“NGS”兼容并蓄 -
干貨分享|SNP研究中,你一定遇到過這些問題,附解答!SNP作為第三代分子標記,其應用非常廣泛,在農業(yè)領域中,可以進行性狀基因的精細定位、分子輔助育種、種子資源鑒定等;在醫(yī)學領域中,可用于疾病的分子遺傳機制研究、疾病基因定位、藥物敏感或疾病易感性位點篩選等,生命科學研究的方方面面,都與之相關。SNP的研究主要分為SNP的發(fā)現(xiàn)及SNP的基因分型。SNP的發(fā)現(xiàn)是應用的基礎,而SNP的基因分型是應用的技術手段。新SNP通常是基于測序技術,利用已有數(shù)據(jù)庫,對多個樣本進行重測序發(fā)現(xiàn)的,但需要進行其他方法的
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新品上市 | Canace高保真酶全新升級,5sec/kb,保真??欤?/a>
在使用傳統(tǒng)高保真酶進行PCR時,難免會遇到一些棘手的問題。例如保真度不夠,擴增得到的片段測序后發(fā)現(xiàn)仍有目的堿基發(fā)生突變或缺失。擴增的時間也相對漫長,有時擴增5kb的片段也要花費將近2個小時的時間?,F(xiàn)小翌推出一款快速高保真PCR以解決您的煩惱!2×HieffCanace®AdvanceFastPCRMasterMix(WithDye)預混液中含有預先添加的電泳指示劑,PCR產物可直接進行電泳,擴增產物為平末端。該產品具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,反應體系中只需加入引物和模板即可 -
破骨細胞培養(yǎng)高成功率的關鍵——高活性RANKL和M-CSF
01破骨細胞及其作用破骨細胞是一種高度分化的多核巨細胞,主要來源于單核/巨噬細胞造血干細胞系,是骨組織吸收的主要功能細胞,參與貫穿生命始終的骨重建過程。建立破骨細胞體外培養(yǎng)方法有利于從細胞與分子水平進行骨吸收機制的研究,也有利于骨質疏松癥、骨硬化癥等代謝性骨病治療藥物的開發(fā)研究。因此,為了深入研究破骨細胞的形成機制并尋找其在疾病治療中的應用,誘導分化破骨細胞成為了一個研究熱點。破骨細胞由血液及骨髓中的單核/巨噬細胞系分化而來,其分化過程經歷破骨細胞前體(osteoclastprecursorce