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  • 漲知識(shí) | qPCR專場(chǎng)一:如何做好擴(kuò)增片段和引物設(shè)計(jì)?

    熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測(cè)方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達(dá)到對(duì)PCR過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,所以在實(shí)驗(yàn)過程中,我們需要注意諸多細(xì)節(jié),謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn),拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)表高分文章。對(duì)于熒光定量PCR數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性而言,反應(yīng)效率至關(guān)重要。在理想狀態(tài)下,PCR
  • 第三代分子標(biāo)記SNP在不同領(lǐng)域的應(yīng)用

    第三代分子標(biāo)記SNP在不同領(lǐng)域的應(yīng)用基因檢測(cè)的目的是鑒定在基因組上對(duì)疾病或復(fù)雜性狀起作用的特殊因子,這種因子通常屬于堿基水平的變異,同時(shí)能穩(wěn)定遺傳給下一代,久而久之成為了不同人群的“遺傳標(biāo)志物”。在基因組學(xué)中,這種標(biāo)志物被稱為“DNA分子標(biāo)記”,它們?cè)谌祟惢蚪M中數(shù)量頻密且功能特異。SNP作為第三代分子標(biāo)記,被廣泛應(yīng)用于疾病診斷和治療、法醫(yī)物證檢驗(yàn)以及動(dòng)植物育種等眾多領(lǐng)域。上一篇文章(不同SNP檢測(cè)技術(shù)的原理—ARMS、KASP、TaqMan、分子信標(biāo)及HRM)我們介紹了SNP分型檢測(cè)的幾種常用
  • 精品推薦 | 僅需5min!高效完成反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)

    精品推薦|僅需5min!高效完成反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)Hifair®AdvanceFast1stStrandcDNASynthesisKit是基于Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit開發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,適用于PCR擴(kuò)增以及RT-qPCR實(shí)驗(yàn)。與Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit相比,具有穩(wěn)定的檢出率、特異性、產(chǎn)量保證,且反轉(zhuǎn)錄總時(shí)長最快可低于6分鐘,大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。產(chǎn)品名稱Hifair®AdvanceFast1stStrandcD
  • 翌圣全能型逆轉(zhuǎn)錄酶重磅上市!

    翌圣全能型逆轉(zhuǎn)錄酶重磅上市!逆轉(zhuǎn)錄酶是逆轉(zhuǎn)錄的核心酶原料,被廣泛應(yīng)用于RT-PCR/qPCR、RNA-seq、單細(xì)胞測(cè)序等場(chǎng)景,但不同應(yīng)用場(chǎng)景對(duì)逆轉(zhuǎn)錄酶有不同的性能要求,如RT-qPCR,需要逆轉(zhuǎn)錄酶具有高靈敏度、高cDNA產(chǎn)量、可兼容復(fù)雜結(jié)構(gòu)模板等;在主流單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)中,還需要具有末端轉(zhuǎn)移酶活性;用于cDNA克隆則需要可以合成全長的cDNA。目前市售的逆轉(zhuǎn)錄酶很難實(shí)現(xiàn)一酶兼具多種應(yīng)用場(chǎng)景,不同的應(yīng)用場(chǎng)景往往需要篩選不同的逆轉(zhuǎn)錄酶。為實(shí)現(xiàn)一個(gè)逆轉(zhuǎn)錄酶可兼具多個(gè)應(yīng)用,翌圣ZymeEditor™酶
  • Nanobody-Tn5,賦予CUT&Tag不一樣的體驗(yàn)

    CUT&Tag技術(shù),作為研究蛋白質(zhì)-DNA互作的新興技術(shù),從問世之初,就一直備受關(guān)注。Nanobody(納米抗體)在藥物抗體研究中的風(fēng)很大,在醫(yī)藥領(lǐng)域備受青睞。那納米抗體怎么就與CUT&Tag關(guān)聯(lián)上了呢?2022年12月,Gon?aloCastelo-Branco課題組和美國紐約基因組中心IvanRaimondi團(tuán)隊(duì)同期在NatureBiotechnology上發(fā)表了關(guān)于nanobody-Tn5的文章。Nanobody-Tn5主要是將納米抗體與Tn5轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行融合,制備出可結(jié)合兩種不同物種(小鼠
  • 不同SNP檢測(cè)技術(shù)的原理——ARMS、KASP、TaqMan、分子信標(biāo)及HRM

    不同SNP檢測(cè)技術(shù)的原理——ARMS、KASP、TaqMan、分子信標(biāo)及HRM單核苷酸多態(tài)性(SingleNucleotidePolymorphisms,SNP)主要是指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性,是人類可遺傳變異中最常見的一種,占所有已知多態(tài)性的90%以上。當(dāng)SNP發(fā)生在基因編碼區(qū)或基因的調(diào)節(jié)區(qū)域時(shí),它會(huì)對(duì)基因表達(dá)產(chǎn)生巨大的影響,從而影響基因的功能,例如鐮狀細(xì)胞貧血、β地中海貧血等單基因遺傳病的發(fā)生主要是由于SNP的出現(xiàn)。同時(shí),研究人員發(fā)現(xiàn),SNP可能有助于預(yù)測(cè)個(gè)
  • 雜交捕獲家族“核心成員”大揭秘!

    雜交捕獲家族“核心成員”大揭秘!近年來,高通量測(cè)序技術(shù)發(fā)展迅速,測(cè)序成本也在逐漸降低。但就現(xiàn)階段而言,全基因組測(cè)序的成本依然很高,且測(cè)序之后得到的龐大數(shù)據(jù)量也導(dǎo)致數(shù)據(jù)分析速度緩慢。與全基因組測(cè)序相比,靶向捕獲測(cè)序可以針對(duì)感興趣的區(qū)域進(jìn)行富集,單個(gè)樣本所需測(cè)序數(shù)據(jù)量顯著降低且分析速度更快。不僅如此,靶向測(cè)序還可以對(duì)目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行深度測(cè)序,在遺傳突變檢測(cè)、腫瘤篩查等領(lǐng)域,相同測(cè)序成本下靶向捕獲測(cè)序能達(dá)到更高的靈敏度。圖1.3種測(cè)序方法簡單對(duì)比靶向捕獲包含雜交捕獲、多重PCR和分子倒置探針捕獲。和PCR
  • 翌圣&華大共發(fā)布中華家系一號(hào)全自動(dòng)化轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)

    翌圣&華大共發(fā)布中華家系一號(hào)全自動(dòng)化轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)自動(dòng)化建庫當(dāng)前,高通量測(cè)序已成為生命科學(xué)領(lǐng)域最有力的工具,極大促進(jìn)了腫瘤、遺傳病和病原等領(lǐng)域的發(fā)展。高通量測(cè)序中的建庫操作仍存在流程繁瑣、人力資源依賴程度高、自動(dòng)化程度低等問題,限制了其在臨床轉(zhuǎn)化上的應(yīng)用。為促進(jìn)生產(chǎn)轉(zhuǎn)型和臨床應(yīng)用,高效穩(wěn)定的自動(dòng)化建庫方案是必由之路。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(transcriptomesequencing)已經(jīng)成為轉(zhuǎn)錄組研究的主要方法,可以全面快速地獲得某一物種特定組織或器官在某一狀態(tài)下的幾乎所有轉(zhuǎn)錄本序列信息,進(jìn)而
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