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mRNA合成的關(guān)鍵步驟之一是將質(zhì)粒DNA進(jìn)行線性化，這一步需要使用限制性內(nèi)切酶，IIs型內(nèi)切酶是質(zhì)粒線性化的內(nèi)切酶，因?yàn)樗鼈冊谧R(shí)別位點(diǎn)下游切割DNA，可確保所設(shè)計(jì)的poly(A)尾的完整性，線性化后的DNA模板上不會(huì)留下“疤痕”，IVT過程中也不會(huì)添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內(nèi)切酶之一，在mRNA合作中起著重要作用。圖1.BsaI識(shí)別位點(diǎn)及切割序列翌圣GMP級別BsaI翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達(dá)，GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，酶切效率高、星號活性低、末端完整性良好，可用于mRNA疫苗生產(chǎn)
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說到RNA提取，總是避不開Trizol（此處指總RNA抽提試劑，下同），作為總RNA提取的方法，裂解能力強(qiáng)，適用范圍廣，適用動(dòng)植物組織還有小量樣本及難提取的組織，例如皮膚，結(jié)締組織，還可以用于細(xì)菌真菌等微生物的總RNA提取，優(yōu)點(diǎn)顯而易見，缺點(diǎn)也是不容忽視，Trizol它離不開氯仿啊！氯仿早在2017年就被世衛(wèi)癌癥研究機(jī)構(gòu)列入2B類致癌清單了，吸入，食入，皮膚吸收，主要作用于中樞神經(jīng)，有麻醉作用，對心、肝、腎有損害，還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險(xiǎn)品，刺激眼睛、呼吸道粘膜，引起慢性咽炎，經(jīng)皮膚、吞
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常用報(bào)告基因有哪些種類？一文讀懂！什么是報(bào)告基因？報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼在內(nèi)源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質(zhì)或酶的基因。報(bào)告基因與目的基因或調(diào)控序列相連，通過間接或直接檢測報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的信號，比如報(bào)告蛋白、mRNA、酶等，直觀反映細(xì)胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄活性或表達(dá)水平。一般報(bào)告基因的特點(diǎn)是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的半衰期是比較關(guān)注的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。編碼產(chǎn)物半衰期和報(bào)告基因的應(yīng)用領(lǐng)域息息相關(guān)。[1]那么報(bào)告基因該如何選擇呢？在選擇報(bào)告基因時(shí)一般
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漲知識(shí)|qPCR專場四：問題圖表分析及實(shí)驗(yàn)案例
漲知識(shí)|qPCR專場四：問題圖表分析及實(shí)驗(yàn)案例熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對PCR過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實(shí)驗(yàn)過程中，我們需要注意諸多細(xì)節(jié)，謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn)，拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)表高分文章呢？在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中，難 -
新品│Endonuclease VIII：精準(zhǔn)切割DNA受損堿基，助力基因損傷修復(fù)研究
新品│EndonucleaseVIII：精準(zhǔn)切割DNA受損堿基，助力基因損傷修復(fù)研究核酸內(nèi)切酶Ⅷ(EndonucleaseVIII,EndoⅧ)是一種具有N-糖基化酶活性(N-glycosylase)和AP-裂解酶(AP-lyase)活性的DNA損傷修復(fù)酶，參與氧化產(chǎn)生的DNA損傷的堿基切除修復(fù)。作用原理EndonucleaseVIII識(shí)別雙鏈DNA上受損堿基并在其N-糖基化酶活性作用下切除雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基，產(chǎn)生一個(gè)脫嘌呤(AP)位點(diǎn)。隨后，在其AP裂解酶活性作用下切割A(yù)P位點(diǎn)的3'和 -
超低殘留分子酶，病原檢測和生物制品質(zhì)控試劑盒開發(fā)利器！
精品推薦|UCF.ME超低殘留分子酶，病原檢測和生物制品質(zhì)控試劑盒開發(fā)利器！近年來全球感染性疾病的發(fā)病率有所上升，病原體呈現(xiàn)多樣化和復(fù)雜化的發(fā)展趨勢，半數(shù)患者存在病原體不明的困境，病原體的快速診斷面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。目前用于臨床病原體檢測的方法主要包括傳統(tǒng)培養(yǎng)法、PCR法、宏基因組測序（mNGS）、病原靶向測序（tNGS）等。新冠核酸檢測讓熒光PCR技術(shù)大放異彩，新冠之后mNGS因抗疫揚(yáng)名，一度被臨床醫(yī)生所青睞，逐步走向?qū)こ０傩占?。tNGS靶向測序技術(shù)更是異軍突起，以其對“PCR”和“NGS”兼容并蓄 -
干貨分享|SNP研究中，你一定遇到過這些問題，附解答！SNP作為第三代分子標(biāo)記，其應(yīng)用非常廣泛，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中，可以進(jìn)行性狀基因的精細(xì)定位、分子輔助育種、種子資源鑒定等；在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，可用于疾病的分子遺傳機(jī)制研究、疾病基因定位、藥物敏感或疾病易感性位點(diǎn)篩選等，生命科學(xué)研究的方方面面，都與之相關(guān)。SNP的研究主要分為SNP的發(fā)現(xiàn)及SNP的基因分型。SNP的發(fā)現(xiàn)是應(yīng)用的基礎(chǔ)，而SNP的基因分型是應(yīng)用的技術(shù)手段。新SNP通常是基于測序技術(shù)，利用已有數(shù)據(jù)庫，對多個(gè)樣本進(jìn)行重測序發(fā)現(xiàn)的，但需要進(jìn)行其他方法的
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新品上市 | Canace高保真酶全新升級，5sec/kb，保真?？?！
在使用傳統(tǒng)高保真酶進(jìn)行PCR時(shí)，難免會(huì)遇到一些棘手的問題。例如保真度不夠，擴(kuò)增得到的片段測序后發(fā)現(xiàn)仍有目的堿基發(fā)生突變或缺失。擴(kuò)增的時(shí)間也相對漫長，有時(shí)擴(kuò)增5kb的片段也要花費(fèi)將近2個(gè)小時(shí)的時(shí)間?，F(xiàn)小翌推出一款快速高保真PCR以解決您的煩惱！2×HieffCanace®AdvanceFastPCRMasterMix(WithDye)預(yù)混液中含有預(yù)先添加的電泳指示劑，PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳，擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端。該產(chǎn)品具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，反應(yīng)體系中只需加入引物和模板即可
